三苯氧胺治疗乳腺癌分子机制及其与CDK4、PCNA的关系

摘要

目的：探究三苯氧胺治疗乳腺癌分子机制及其与CDK4、PCNA周期的关系。方法：采用流式细胞仪检测三苯氧胺（TAM）作用的ER（-）小鼠几乳腺癌MA782细胞的细胞凋亡率与细胞周期分布；采用免疫法检测CDK4、PCNA蛋白的表达量变化情况，并使用病理图像软件进行半定量分析；MTT法检测细胞增殖的活性。结果：2μmol/LTAM组未见凋亡峰，S期、G0/G1未见明显变化；浓度6、10μmol/LTAM组有凋亡峰，且凋亡率、S期、G0/G1期与对照组相比，P＜0.05；MTT检测显示，2μmol/L浓度的TAM作用于细胞后48h发生细胞生长抑制不明显，72h后变化明显；6μmol/L浓度的TAM在2天后发生显著性差异，P＜0.01；10μmol/L浓度的TAM在1天后发生显著性差异，P＜0.01；PCNA免疫组织化学染色：半定量分析平均灰度值149.1，判定为强阳性。2μmol/LTAM作用72h后恢复值下降至108.25，于对照组相比P＜0.01。剩余两组分别在48h、72h后，平均灰度值下降最明显，与对照组相比P＜0.01；CDK4蛋白半定量分析结果：半定量分析平均灰度值107.2，不同时间2μmol/LTAM作用细胞染色结果无差异性，P＞0.05；6、10mol/LTAM作用细胞48h、72h后的灰度值明显下降，与对照组相比有明显差异，两个时间段相比也有差异性，P＜0.01。结论：AM对ER阴性乳腺癌细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用，这个作用可以通过TAM下调PCNA、CDK4蛋白量完成。