大叶茜草素对宫颈癌细胞增殖、粘附及糖酵解水平的分子机制研究

摘要

目的 探究大叶茜草素对人宫颈癌细胞增殖、粘附、糖酵解水平及磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）的调控作用。方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞，分为对照组（不做干预）、12.5、25、50、100 μmol/L大叶茜草素组，采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测细胞活力，筛选大叶茜草素浓度。而后将HeLa细胞分为对照组、实验组（50 μmol/L大叶茜草素）、阳性药物组（20 μg/mL 5-氟尿嘧啶）、激活剂组（50 μmol/L大叶茜草素+10 μmol/L PI3K/AKT通路激活剂SC-79）和抑制剂组（50 μmol/L大叶茜草素＋2 μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002），干预24 h。采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷（EdU）法、细胞粘附实验、乳酸、葡萄糖检测试剂盒、蛋白免疫印迹（WB）法对细胞增殖率、粘附数、乳酸含量、葡萄糖消耗水平、糖酵解及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达量进行分析。结果 50 μmol/L大叶茜草素干预后细胞活力接近50%，因此选取此浓度进行后续实验。与对照组相比，实验组和阳性药物组细胞增殖率、粘附数、乳酸含量、葡萄糖消耗水平、己糖激酶2（HK2）、乳酸脱氢酶A（LDHA）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、p-PI3K、p-AKT蛋白表达量均显著降低（P<0.05）；与实验组相比，抑制剂组细胞增殖率、粘附数、乳酸含量、葡萄糖消耗水平、HK2、LDHA、GAPDH、p-PI3K、p-AKT蛋白表达量进一步显著降低（P<0.05）；而激活剂组上述指标变化趋势与抑制剂组相反（P<0.05）。结论 大叶茜草素可抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖、粘附、糖酵解等生物学行为，其作用机制可能与抑制PI3K/AKT通路转导有关。